Wester мембранный бак для водоснабжения wav200 top: Wester WAV-200 top Гидроаккумулятор для систем водоснабжения

Содержание

Мембранный бак (гидроаккумулятор) Wester WAV 200 top 0-14-1510 (Россия)

Объем, л200
Назначениедля водоснабжения
Расположениевертикальный
Монтажнапольный
Материал корпуса сталь углеродистая
Тип мембраны сменная мембрана
Диаметр подключения, дюйм 1 1/4″ ВР
Заводская настройка давления, бар
1,5
Максимальное рабочее давление, бар 10
Рабочая температура, °C +1. ..+100
Габариты
— диаметр, мм 580
— высота, мм 1 120
Вес, кг 37,0

Расширительный бак для систем водоснабжения производства Wester серии WAV top со сменной мембраной. 

Эластичная мембрана  выполнена из материала EPDM — этиленпропиленовой резины , которую отличает высокая прочность и долговечность.

Необходим для установки в системах холодного и горячего водоснабжения.

Производит компенсацию  расширения при повышении температуры, обеспечивает постоянное давление в системе, защищает от гидравлического удара.

Встраивается при помощи резьбового соединения. Имеет дополнительный штуцер (нар.-вн. 3/4″ х 1/2″), куда можно установить манометр или другие устройства, либо заглушку.

Располагается вертикально на стойках.

Материалы для скачивания :

  • РУКОВОДСТВО ПО МОНТАЖУ НАСОСЫ WCP ( 2.017мб. PDF )
  • ИНСТРУКЦИЯ НАСОСЫ WPE ( 0.648мб. PDF )
  • РУКОВОДСТВО ПО МОНТАЖУ НАСОСЫ WCP 130 ( 2.013мб. PDF )
  • ИНСТРУКУЦИЯ БОЙЛЕРЫ WHU ( 0. 859мб. PDF )
  • СЕРТИФИКАТ КОЛЛЕКТОРЫ WESTER и АКВАТЕК
    все для воды ( 0.619мб. PDF )
  • ПАСПОРТ РАСШИРИТЕЛЬНЫЕ БАКИ WRV 8-1000 ( 0.464мб. PDF )
  • ПАСПОРТ РАСШИРИТЕЛЬНЫЕ БАКИ WRV 1500-10000 ( 0.305мб. PDF )
  • ПАСПОРТ РАСШИРИТЕЛЬНЫЕ БАКИ WRV 8-10000 (16
    бар) ( 0. 529мб. PDF )
  • ПАСПОРТ ГИДРОАККУМУЛЯТОРЫ WAV и WAO 8-1000 ( 0.86мб. PDF )
  • ПАСПОРТ ГИДРОАККУМУЛЯТОРЫ WAV и WAO
    1500-10000 ( 0.415мб. PDF )
  • ПАСПОРТ ГИДРОАККУМУЛЯТОРЫ WAV и WAO 8-10000
    (16 бар) ( 1.061мб. PDF )
  • ПАСПОРТ ГИДРОАККУМУЛЯТОРЫ WAV и WAO Premium ( 0. 735мб. PDF )
  • ПАСПОРТ ГИДРОАККУМУЛЯТОРЫ WDV Premium
    гелио ( 0.241мб. PDF )
  • ПАСПОРТ КРАНЫ ГАЗОВЫЕ Wester W100 ( 2.811мб. PDF )
  • ПАСПОРТ РАДИАТОРЫ ПАНЕЛЬНЫЕ WESTER ( 4.942мб. PDF )
  • СЕРТИФИКАТ РАДИАТОРЫ ПАНЕЛЬНЫЕ WESTER ( 0.569мб. PDF )
  • ДЕКЛАРАЦИЯ НАСОСЫ WESTER_ АКВАТЕК ( 3. 228мб. PDF )
  • СЕРТИФИКАТ НАСОСЫ ЦИРКУЛЯЦИОННЫЕ
    WESTER_ АКВАТЕК ( 1.28мб. PDF )
  • СЕРТИФИКАТ НАСОСНЫЕ СТАНЦИИ AQUA BOOSTER,
    ДРЕНАЖНЫЕ НАСОСЫ WESTER_ AQUATECH_АКВАТЕК ( 3.811мб. PDF )
  • СЕРТИФИКАТ WHU_WHZ_12.02.2023г. ( 0.814мб. PDF )
  • ИНСТРУКЦИЯ БОЙЛЕРЫ Wester WHZ_2021 ( 6. 374мб. PDF )
  • СЕРТИФИКАТ БАКИ МЕМБРАННЫЕ Wester
    (МеталлоФорм)_26.01.2027г. ( 1.64мб. PDF )
  • Сертификаты производителя

Мембранные баки для водоснабжения Wester WAV-200 в Череповце: 652-товара: бесплатная доставка [перейти]

Партнерская программаПомощь

Череповец

Каталог

Каталог Товаров

Одежда и обувь

Одежда и обувь

Стройматериалы

Стройматериалы

Здоровье и красота

Здоровье и красота

Текстиль и кожа

Текстиль и кожа

Детские товары

Детские товары

Электротехника

Электротехника

Продукты и напитки

Продукты и напитки

Дом и сад

Дом и сад

Мебель и интерьер

Мебель и интерьер

Промышленность

Промышленность

Сельское хозяйство

Сельское хозяйство

Все категории

ВходИзбранное

Мембранные баки для водоснабжения Wester WAV-200

19 110

Бак мембранный для водоснабжения WAV 200 top Wester Цвет: синий, Серия: WAV, Объём, л: 200

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

31 039

Мембранный бак для водоснабжения WAV 200 Wester 0141510 Производитель: Wester, Объем: 200л,

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

101 180

Гидроаккумулятор WAV 200 л 16 бар вертикальный Wester 2-14-0270 Производитель: Wester, Объем: 200

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

651 203

Бак мембранный для водоснабжения Wester WAV 2000 л (WAV2000) Производитель: Wester, Объем: 2000л

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

20 400

Расширительный мембранный бак Wester WAV 200 200 л для водоснабжения Производитель: Wester, Объем:

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

20 881

Гидроаккумулятор Wester WAV-200 Производитель: Wester, Объем: 200 л, Установка: горизонтальная

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

29 485

Wester WAV 200 (top) для водоснабжения вертикальный расширительный бак

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

24 707

Мембарнный бак для водоснабжения Wester WAV 200 top

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

29 485

Wester WAV 200 (top) для водоснабжения вертикальный расширительный бак

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

389 000

Мембранный бак Wester WAV 2000 10 бар Производитель: Wester, Установка: вертикальная, Для

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

67 312

Мембранный бак (гидроаккумулятор) Wester WAV 200 (16 бар) Производитель: Wester, Для водоснабжения:

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

371 817

Мембранный бак (гидроаккумулятор) Wester WAV 2000 Производитель: Wester, Установка: вертикальная,

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

20 380

Бак расширительный мембранный Wester WRV — 200 л. (PN10, Tmax100°С, вертикальный, на ножках)

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

29 541

Бак для системы водоснабжения UNI-FITT WAV 200 (вертикальный) Производитель: UNI-FITT

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

352 215

Мембранный бак Wester WAV 2000 10 бар Производитель: Wester, Установка: вертикальная, Для

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

16 356

Мембранный бак Wester WAV 200 расширительный для ГВС Производитель: Wester, Для отопления: Да

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

23 632

UNI-FITT Бак для системы водоснабжения WAV 200 (вертикальный) Материал: Сталь, Функционал:

ПОДРОБНЕЕЕще цены и похожие товары

Бак мембранный для водоснабжения WAV 8 Wester (0-14-1020) Цвет: Синий, Материал корпуса: Сталь,

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

Бак мембранный для водоснабжения WAV 18 Wester (0-14-1040) Цвет: Синий, Материал корпуса: Сталь,

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

Бак мембранный для водоснабжения WAO 50, горизонтальный, контрфланец из нержавеющей стали Wester Premium

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

Бак мембранный для водоснабжения WAO 80, горизонтальный, контрфланец из нержавеющей стали Wester Premium

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

10 870

Бак мембранный для водоснабжения WAV 100, контрфланец из нержавеющей стали Wester Premium Цвет:

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

Бак мембранный для водоснабжения WAV 8 Wester Цвет: синий, Серия: WAV, Объём, л: 8

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

Бак мембранный для водоснабжения WAV 12 Wester Цвет: синий, Серия: WAV, Объём, л: 12

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

Бак мембранный для водоснабжения WAV 24 Wester Цвет: синий, Серия: WAV, Объём, л: 24

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

Бак мембранный для водоснабжения WAV 18 Wester Цвет: синий, Серия: WAV, Объём, л: 18

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

Бак мембранный для водоснабжения WAV 12, контрфланец из нержавеющей стали Wester Premium Цвет:

В МАГАЗИНЕще цены и похожие товары

2 страница из 18

Мембраны для вестерн-блоттинга и фильтровальная бумага

Нитроцеллюлозные мембраны, мембраны из ПВДФ, низкофлуоресцентные мембраны и фильтровальная бумага для вестерн-блоттинга доступны в различных форматах, включая предварительно нарезанные размеры, соответствующие стандартным размерам геля
.


  • Изображение

    Система Trans-Blot Turbo Transfer

    Система Trans-Blot Turbo представляет собой устройство для быстрого переноса белка, которое может переносить белок на мембрану всего за 3 минуты. Пакеты для переноса Trans-Blot Turbo обеспечивают большую эффективность переноса за меньшее время.

  • Изображение

    ПВДФ-мембрана Immun-Blot®

    ПВДФ-мембрана Immun-Blot® компании Bio-Rad идеально подходит для хемилюминесцентного и колориметрического вестерн-блоттинга. Эта мембрана PVDF очень сильно удерживает целевой белок, уменьшая неспецифическое связывание белка.

  • Изображение

    Immun-Blot ® ПВДФ-мембрана с низкой флуоресценцией

    ПВДФ-мембрана с низкой флуоресценцией компании Bio-Rad одобрена для флуоресцентного вестерн-блоттинга. Низкая автофлуоресценция этой мембраны обеспечивает более длительную экспозицию и более высокую чувствительность без увеличения фона.

  • Изображение

    Мембрана Sequi-Blot™ PVDF

    Мембрана Sequi-Blot™ PVDF компании Bio-Rad обеспечивает исключительную производительность при секвенировании белков, обеспечивая связывающую способность для секвенирования даже образцов с низким содержанием.

  • Изображение

    Нитроцеллюлозная мембрана, 0,45 мкм

    Нитроцеллюлоза Bio-Rad — проверенная среда для вестерн-, нозерн- и саузерн-блоттинга. Размер пор 0,45 мкм рекомендуется для большинства аналитических блоттинга, включая перенос белков, одноцепочечной ДНК и РНК.

  • Изображение

    Нитроцеллюлозная мембрана, 0,2 мкм

    Нитроцеллюлозная мембрана Bio-Rad с размером пор 0,2 мкм оптимизирована для вестерн-, нозерн- и саузерн-блоттинга нуклеиновых кислот и низкомолекулярных белков.

  • Изображение

    Нитроцеллюлозная мембрана на подложке, 0,45 мкм

    Эта нитроцеллюлозная мембрана толщиной 0,45 мкм, изготовленная из чистой нитроцеллюлозы и отлитая на инертной синтетической подложке, представляет собой прочную подложку для приложений, связанных с нуклеиновыми кислотами и белками, которая может выдерживать многократное повторное зондирование.

  • Изображение

    Нитроцеллюлозная мембрана на подложке, 0,2 мкм

    Эта мембрана из чистой нитроцеллюлозы 0,2 мкм, покрытая инертной синтетической подложкой, идеально подходит для исследований нуклеиновых кислот и белков, требующих многократного повторного зондирования.

  • Изображение

    Бумага для абсорбции блотов

    Фильтровальная бумага для блоттинга компании Bio-Rad доступна в различных вариантах толщины и представляет собой высококачественную бумагу из 100% хлопкового волокна для использования в электрофорезе и блоттинге.

Support
Dokumente
Bestellen
Unsere Produkte
Unternehmen

Вестерн-блот-перенос белков | Thermo Fisher Scientific

Одним из ключевых этапов рабочего процесса вестерн-блоттинга является перенос белков из полиакриламидного геля после электрофореза на мембрану из нитроцеллюлозы или поливинилидендифторида (ПВДФ), чтобы можно было обнаружить специфические белки с помощью методов иммунного обнаружения.

Мы разработали системы электрофоретического переноса для влажных, полусухих и сухих методов блоттинга. Используйте приведенную ниже таблицу, чтобы выбрать подходящий метод переноса для ваших нужд вестерн-блоттинга.

Мембраны для переноса Буферы для переноса

  • Системы переноса вестерн-блоттинга
  • Сравнение методов переноса
  • Документы

Какая система переноса вестерн-блоттинга подходит именно вам?

Влажный перевод Полусухой перевод Dry transfer

Mini Blot Module

XCell II Blot Module

SureLock Tandem Midi Blot Module

Power Blotter Systems

iBlot 2 Dry Blotting System
Capacity:
1 мини-гель на модуль блоттинга; 1–2 модуля блоттинга на бак
Вместимость:
до 2 мини-блотов
Вместимость:
1 миди-гель на модуль блота; 1–2 модуля блоттинга на бак
емкость:
1–4 MINI OR 1–2 MIDI GELS
СМОТРЕТЬ:
1–2 MINI OR MIDI GEL
Время передачи:
Время передачи:
.
60–120 min
Transfer time:  
30 min
Transfer time:
5–10 min
Transfer time:
7 min
Blotting area:
9 x 9 см
Площадь блоттинга:
9 x 9 см
Область блоттинга:
9,2 x 14,4 см
Зона прозрачного x 13,5 см
Площадь блоттинга: буфер перевода. Объем:
220 мл на модуль блота
Трансферный буфер:
200 мл
Том:
200 мл
.0123 Объем буфера для переноса:
Нарезанные мембраны и фильтры: 50–100 мл;
Предварительно собранные стеки переводов: буфер не требуется
Торговый буфер Том:
Буфер не требуется
Питание: Внешнее . Средство питания: Внешнее . Средство питания: . Внешнее . Средство питания: . Источник питания: Внутренний Источник питания: Внутренний
Необходимое оборудование:
Mini Gel Tank: вместимость до 2 модулей Mini Blot
Необходимое оборудование:
XCell SureLock Mini-Cell: вместимость до 2 модулей блоттинга3 9011 оборудование :
Тандемный миди-гель для гель-бака SureLock: емкость для 2 модулей блоттинга
––– –––
Узнать больше Узнать больше Узнать больше
  • 23
  • Узнать больше

    Сравнение методов переноса вестерн-блоттинга

     
      Wet transfer Semi-dry transfer Dry transfer
    Setup Hands-on, requires preparing transfer buffer ~15–20 мин. ~5–10 мин для комплектов Select, ~10–15 мин для предварительно нарезанных мембран и фильтров ~5 мин.
    Очистка Обширная очистка после каждого использования, включая удаление опасных отходов метанола 30–120 min 7–10 min 7 min
    Throughput +++ +++ +
    Performance +++ ++ +++
    Ease of use ++ +++ +++
    Transfer buffer requirements Требуется метанол Буферы для переноса, не содержащие метанола, или буфер не требуется для предварительно собранных штабелей Буфер не требуется
    Особые указания Для более длительных переносов может потребоваться охлаждение Можно использовать несколько систем, включая буферы Towbin Требуются предварительно собранные стопки для переноса

    Сравнение влажного, полусухого и сухого методов переноса

    Эффективный и надежный перенос белка из геля на промокательную мембрану — это Краеугольный камень успешного западного эксперимента по обнаружению. Точность результатов зависит от эффективности переноса метода вестерн-блоттинга. Традиционный мокрый перенос обеспечивает высокую эффективность, но требует времени и усилий. Полусухой блоттинг обеспечивает удобство и экономию времени благодаря гибкости использования нескольких типов буферных систем или предварительно собранных стопок без буфера. Однако полусухой перенос может иметь более низкую эффективность переноса белков с большой молекулярной массой (>300 кДа). Сухой электроблотинг обеспечивает как высокое качество переноса в сочетании со скоростью, так и удобство, поскольку для сухого электроблоттинга не требуются дополнительные буферы.

    Три основных способа переноса белков из SDS-PAGE или нативных гелей на нитроцеллюлозные, ПВДФ или нейлоновые мембраны:
    • Электроперенос во влажном резервуаре
    • Полусухой электроперенос
    • Сухой электроперенос

    Электротрансфер с мокрым баком

    При выполнении влажного переноса гель сначала уравновешивается буфером для переноса. Затем гель помещают в «переносной сэндвич» (фильтровальная бумага-гель-мембрана-фильтровальная бумага), амортизирующий прокладками и прижимаемый друг к другу опорной сеткой. Поддерживаемый гель-сэндвич помещают вертикально в резервуар между проволочными электродами из нержавеющей стали/платины и заполняют буфером для переноса.

    Электроперенос нескольких гелей может осуществляться в стандартном полевом варианте, который выполняется либо при постоянном токе (от 0,1 до 1 А), либо при напряжении (от 5 до 30 В) от 1 часа до ночи. Перенос обычно выполняется с пакетом со льдом и при температуре 4°C, чтобы уменьшить выделение тепла. Для одного геля существует вариант сильного поля, который может сократить время переноса до 30 минут, но требует использования высокого напряжения (до 200 В) или сильного тока (до 1,6 А) и системы охлаждения. чтобы рассеять огромное количество тепла.

    Эффективность переноса 80–100% достижима для белков в диапазоне 14–116 кДа. Эффективность передачи улучшается с увеличением времени передачи. Однако с увеличением времени возникает риск избыточного переноса (просачивания) белков через мембрану, особенно для белков с более низкой молекулярной массой (<30 кДа) при использовании мембран с большим размером пор (0,45 мкм).

    Аппарат для переноса резервуаров для вестерн-блоттинга. Схема, показывающая сборку типичного аппарата для вестерн-блоттинга с положением геля, мембраны для переноса и направлением белка по отношению к положению электрода.

    Полусухой электроперенос

    Для полусухого переноса белка сэндвич для переноса помещается горизонтально между двумя пластинчатыми электродами в аппарате для полусухого переноса. Для этого полусухого переноса очень важно, чтобы гель был предварительно уравновешен буфером для переноса. Чтобы максимизировать ток, проходящий через гель, а не вокруг геля, количество буфера, доступного во время переноса, ограничено тем, что содержится в сэндвиче, поэтому полезно, если очень толстая фильтровальная бумага (толщиной ~ 3 мм) и мембрана также достаточно пропитаны буфером. Точно так же очень важно, чтобы листы фильтровальной бумаги и мембрана были обрезаны по размеру геля.

    От одного до четырех гелей можно быстро нанести на мембраны методом электроблоттинга. Метанол может быть включен в буфер для переноса, но не следует использовать другие органические растворители, включая ароматические углеводороды, хлорированные углеводороды и ацетон, чтобы не повредить полусухую промокательную бумагу. Электроперенос осуществляется либо при постоянном токе (от 0,1 до ~0,4 А), либо при напряжении (от 10 до 25 В) в течение 10 до 60 минут. Не содержащие метанола буферы для переноса рекомендуются для сокращения времени переноса до от 7 до 10 90-140 минут. Эффективность переноса от 60 до 80% может быть достигнута для белков с молекулярной массой от 14 до 116 кДа, для переноса белков с более высокой молекулярной массой требуется более длительное время переноса.

    Полусухой перенос для электроблоттинга. Блоттер Invitrogen Power разработан специально для быстрого полусухого переноса белков с молекулярной массой 10–300 кДа из полиакриламидных гелей на нитроцеллюлозные или ПВДФ-мембраны за 5–10 минут. Power Blotter оснащен встроенным блоком питания, оптимизированным для обеспечения последовательного и высокоэффективного переноса белка при использовании с обычно используемыми сборными или самодельными гелями (SDS-PAGE) и мембранами из нитроцеллюлозы или PVDF.

    Сухой электроперенос

    В методах сухого электроблоттинга используется специальный сэндвич-трансфер, содержащий инновационные компоненты, которые исключают использование традиционных буферов для переноса. Вместо буферных емкостей или пропитанной фильтровальной бумаги используется уникальная гелевая матрица (переносной стек), содержащая буфер. Высокая ионная плотность гелевой матрицы обеспечивает быстрый перенос белка. Во время блоттинга медный анод не выделяет газообразный кислород в результате электролиза воды, что снижает искажение блотов. Обычные методы переноса белка, в том числе влажные и полусухие, используют инертные электроды, генерирующие кислород. Как правило, время переноса сокращается за счет укороченного расстояния между электродами, высокой напряженности поля и высокого тока.

    Сухой перенос методом электроблоттинга. Система сухого блоттинга Invitrogen iBlot 2 обеспечивает быстрый вестерн-перенос без использования буферов. Эта система эффективно выделяет белки из акриламидных гелей менее чем за 7 минут и совместима как с мембранами из ПВДФ, так и с нитроцеллюлозными мембранами. Система iBlot 2 имеет производительность, сравнимую с традиционными методами влажного переноса, за короткое время.

    Системы переноса вестерн-блотов

    Какая система переноса вестерн-блоттинга подходит именно вам?

    19 003119 00121 Узнать больше9 00121 Узнать больше Сравните способы перевода

    Сравнение методов переноса вестерн-блоттинга

    Wet transfer Semi-dry transfer Dry transfer

    Mini Blot Module

    XCell II Blot Module

    SureLock Tandem Midi Blot Module

    Power Blotter Systems

    iBlot 2 Система сухого блоттинга
    Вместимость:
    1 мини-гель на модуль блоттинга; 1–2 модуля блоттинга на бак
    Вместимость:
    до 2 мини-блотов
    Вместимость:
    1 миди-гель на модуль блота; 1–2 модуля блоттинга на бак
    Вместимость:
    1–4 геля мини или 1–2 миди
    Вместимость:
    1–2 геля мини или 1 миди
    94 время переноса: 60 ​​мин
    Время передачи:
    60–120 мин.
    Время передачи:  
    30 мин.
    Время передачи:
    5–10 мин
    Время передачи:
    7 мин. 9.2 x 14.4 cm
    Blotting area:
    10 x 18 cm or
    21 x 22.5 cm
    Blotting area:
    8.5 x 13.5 cm
    Blotting area: Transfer buffer volume:
    220 mL на модуль блота
    Объем буфера для переноса:
    200 мл
    Объем буфера для переноса:
    300 мл на модуль блота
    Предварительно собранные стеки передачи Select: буфер не требуется
    Объем буфера передачи:
    Буфер не требуется
    Источник питания: Внешний Источник питания: Внешний Источник питания:
    Внешний
    Источник питания: Внутренний Источник питания: Внутренний
    Обязательный оборудование:
    . Необходимое оборудование:
    XCell SureLock Mini-Cell: емкость для 2 модулей блоттинга
    Необходимое оборудование:
    Тандемный миди-гель для гель-бака SureLock: емкость для 2 модулей блоттинга
    ––– –––
    Узнать больше Узнать больше Узнать больше Узнать больше Узнать больше
    90151 Перенос0140
     
      Влажный перенос Полусухой перенос0114
    Настройка Практическое занятие, требуется подготовка буфера для переноса ~15–20 мин. ~5–10 мин. со стопками Select, ~10–15 мин.
    Очистка Обширная очистка после каждого использования, включая удаление опасных отходов метанола Легкая очистка после каждого использования Минимальная при длительном использовании
    30–120 min 7–10 min 7 min
    Throughput +++ +++ +
    Performance +++ ++ +++
    Ease of use ++ +++ +++
    Transfer buffer requirements Requires methanol Methanol-free transfer буферы или буфер не требуется для предварительно собранных стеков Не требуется буфер
    Специальные соображения Можно использовать охлаждение Многочисленные системы. -методы сухого и сухого переноса

    Эффективный и надежный перенос белка из геля на мембрану для блоттинга является краеугольным камнем успешного эксперимента по западному обнаружению. Точность результатов зависит от эффективности переноса метода вестерн-блоттинга. Традиционный мокрый перенос обеспечивает высокую эффективность, но требует времени и усилий. Полусухой блоттинг обеспечивает удобство и экономию времени благодаря гибкости использования нескольких типов буферных систем или предварительно собранных стопок без буфера. Однако полусухой перенос может иметь более низкую эффективность переноса белков с большой молекулярной массой (>300 кДа). Сухой электроблотинг обеспечивает как высокое качество переноса в сочетании со скоростью, так и удобство, поскольку для сухого электроблоттинга не требуются дополнительные буферы.

    Три основных способа переноса белков из SDS-PAGE или нативных гелей на нитроцеллюлозные, ПВДФ или нейлоновые мембраны:
    • Электроперенос во влажном резервуаре
    • Полусухой электроперенос
    • Сухой электроперенос

    Электротрансфер с мокрым баком

    При выполнении влажного переноса гель сначала уравновешивается буфером для переноса. Затем гель помещают в «переносной сэндвич» (фильтровальная бумага-гель-мембрана-фильтровальная бумага), амортизирующий прокладками и прижимаемый друг к другу опорной сеткой. Поддерживаемый гель-сэндвич помещают вертикально в резервуар между проволочными электродами из нержавеющей стали/платины и заполняют буфером для переноса.

    Электроперенос нескольких гелей может осуществляться в стандартном полевом варианте, который выполняется либо при постоянном токе (от 0,1 до 1 А), либо при напряжении (от 5 до 30 В) от 1 часа до ночи. Перенос обычно выполняется с пакетом со льдом и при температуре 4°C, чтобы уменьшить выделение тепла. Для одного геля существует вариант сильного поля, который может сократить время переноса до 30 минут, но требует использования высокого напряжения (до 200 В) или сильного тока (до 1,6 А) и системы охлаждения. чтобы рассеять огромное количество тепла.

    Эффективность переноса 80–100% достижима для белков в диапазоне 14–116 кДа. Эффективность передачи улучшается с увеличением времени передачи. Однако с увеличением времени возникает риск избыточного переноса (просачивания) белков через мембрану, особенно для белков с более низкой молекулярной массой (<30 кДа) при использовании мембран с большим размером пор (0,45 мкм).

    Аппарат для переноса резервуаров для вестерн-блоттинга. Схема, показывающая сборку типичного аппарата для вестерн-блоттинга с положением геля, мембраны для переноса и направлением белка по отношению к положению электрода.

    Полусухой электроперенос

    Для полусухого переноса белка сэндвич для переноса помещается горизонтально между двумя пластинчатыми электродами в аппарате для полусухого переноса. Для этого полусухого переноса очень важно, чтобы гель был предварительно уравновешен буфером для переноса. Чтобы максимизировать ток, проходящий через гель, а не вокруг геля, количество буфера, доступного во время переноса, ограничено тем, что содержится в сэндвиче, поэтому полезно, если очень толстая фильтровальная бумага (толщиной ~ 3 мм) и мембрана также достаточно пропитаны буфером. Точно так же очень важно, чтобы листы фильтровальной бумаги и мембрана были обрезаны по размеру геля.

    От одного до четырех гелей можно быстро нанести на мембраны методом электроблоттинга. Метанол может быть включен в буфер для переноса, но не следует использовать другие органические растворители, включая ароматические углеводороды, хлорированные углеводороды и ацетон, чтобы не повредить полусухую промокательную бумагу. Электроперенос осуществляется либо при постоянном токе (от 0,1 до ~0,4 А), либо при напряжении (от 10 до 25 В) в течение 10 до 60 минут. Не содержащие метанола буферы для переноса рекомендуются для сокращения времени переноса до от 7 до 10 90-140 минут. Эффективность переноса от 60 до 80% может быть достигнута для белков с молекулярной массой от 14 до 116 кДа, для переноса белков с более высокой молекулярной массой требуется более длительное время переноса.

    Полусухой перенос для электроблоттинга. Блоттер Invitrogen Power разработан специально для быстрого полусухого переноса белков с молекулярной массой 10–300 кДа из полиакриламидных гелей на нитроцеллюлозные или ПВДФ-мембраны за 5–10 минут. Power Blotter оснащен встроенным блоком питания, оптимизированным для обеспечения последовательного и высокоэффективного переноса белка при использовании с обычно используемыми сборными или самодельными гелями (SDS-PAGE) и мембранами из нитроцеллюлозы или PVDF.

    Сухой электроперенос

    В методах сухого электроблоттинга используется специальный сэндвич-трансфер, содержащий инновационные компоненты, которые исключают использование традиционных буферов для переноса. Вместо буферных емкостей или пропитанной фильтровальной бумаги используется уникальная гелевая матрица (переносной стек), содержащая буфер. Высокая ионная плотность гелевой матрицы обеспечивает быстрый перенос белка. Во время блоттинга медный анод не выделяет газообразный кислород в результате электролиза воды, что снижает искажение блотов. Обычные методы переноса белка, в том числе влажные и полусухие, используют инертные электроды, генерирующие кислород. Как правило, время переноса сокращается за счет укороченного расстояния между электродами, высокой напряженности поля и высокого тока.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *