Бис акриламид: Am-O172-0.25 N,N’-Метилен-бис-акриламид (Ultra Pure Grade, >99,0%) (250 г)

0301100019514000035 поставка реативов ( согласно техническому заданию) для нужд ИБГ УНЦ РАН

Масло минеральное Фасовка — не менее 500 мл Стандарт качества – для молекулярнаой биологии Плотность — не более 0.85 г/мл ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░	░░░░░░
Носитель для синтеза олигонуклеотидов 3′-Флуоресцеин CPG Фасовка — не менее 100 мг Назначение — научные исследования Температура хранения — от -10° до -30°C ОКПД 24.66. 42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
Носитель для синтеза нуклеотидов Cyanine 3 CPG Фасовка — не менее 0.1 г Назначение — научные исследования Температура хранения — от -10° до -30°C ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
Носитель для синтеза нуклеотидов 3′-BHQ-2 CPG Фасовка — не менее 0. 1 г Соединение для разбавления — безводный ацетонитрил Защита от света — наличие Температура хранения — от -10° до -30°C ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░░	░░░░░░░░
N,N’-Метилен-бис-акриламид Фасовка — не менее25 г Молярный вес — 154.17 Химическая формула — C7h20O2N2 Чистота — не менее 99% Акриловая кислота — не более 0.001% Дезоксирибонуклеаза — отсутствие pH (1%, 0.1M NaCl) — 5.0 Протеаза — отсутствие Рибонуклеаза — отсутствие Температура хранения — от 22° до 26°C ОКПД 24. 66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░░
Pfu ДНК-полимераза (рекомбинантная), 100 е.а. Рекомбинантная — соответствие Количество в упаковке — не менее 100 e.a. Концентрация — не менее 2,5 е.а./мкл Молекулярный вес — 90,1 кДа, соответствие Источник E.coli с клонированным геном из Pyrococcus furiosus — соответствие Два 10Х реакционных буфера, 25 мМ раствор MgCl2 — наличие Сохраняет 95% активности после 2 часов инкубации при 95оС — соответствие Производство ПЦР продуктов с тупым концом — наличие Встраивание модифицированных нуклеотидов — наличие ОКПД 24. 66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
Антибиотик гигромицин В Фасовка — не менее 20 мл Концентрация — не менее 50 мг/мл Температура хранения — от 2 до 8 °C Форма — жидкая ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░░	░░░░░░░
Амфолит100хBio-Lyte 3\10 Ampholyte Объем — не менее 1 мл Концентрация — не менее х100 Диапазон рН — 3. 5-9.5 Температура хранения — от 2°до 8°С ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
2-Меркаптоэтанол Фасовка — не менее 100 мл Молекулярный вес — 78.13 Химическая формула — C2H6OS Хранение — при комнатной температуре Чистота — не менее 99% Дезоксирибонуклеаза — отсутствие Протеаза — отсутствие Рибонуклеаза — отсутствие Вода — не более 0.5% ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░	░░░░░░░
Натрий лауроилсаркозин (саркозил) Фасовка — не менее 50 г Молекулярный вес — 293. 3 Химическая формула — C15h38NNaO3 Хранение — при комнатной температуре Чистота — не менее 95% Натрий лаурат — 4% pH (10%, вода, 25°C) — 7.5-8.5 ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░	░░░░░░
Су3 фосфорамидит Фасовка — не менее 0.048 г Количество — не менее 50 мкМоль Молекулярный вес — 480.58 Химическая формула — C25h51N2O5P Соединение для разбавления — безводный ацетонитрил Рекомендованное время для связи — 3 мин 0.02 М йод для избежания деградации цианинового красителя Температура хранения — от -10° до -30°C ОКПД 24. 66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░░	░░░░░░░░
ЧАПС (CHAPS) Фасовка — не менее 1 г Форма — порошок Детергент — наличие Температура хранения — от 2°до 8°С ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░░
HEPES, натриевая соль Фасовка — не менее 100 г Чистота — не менее 99,0% ДНКазы — отсутствие Протеазы — отсутствие РНКазы — отсутствие pKa при 25°C — 7. 45-7.65 ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
Стрипы с нанесенными амфолитами ReadyStrip IPG Strips ph 4-7 Стрипы с иммобилизованным градиентом рН — наличие Фасовка — не менее 12 шт Длина — не менее 7 см рН 4-7 — наличие Температура хранения -20°C ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░░
FastRuler™ ДНК-маркер, 100-5000 п. н., в растворе для нанесения на гель (50-333 appl.) Количество в упаковке — не менее 1 мл Количество фрагментов — не менее 5 Диапазон длин фрагментов – 100-5000 п.н. Буфер с красителями для нанесения на гель — наличие Концентрация — не менее 20 нг/мкл Готов к использованию — соответствие ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
T4 ДНК-полимераза, 100 e.a. Количество в упаковке — не менее 100 е.а. Концентрация — не менее 5 е.а./мкл Мономер, молекулярный вес — 104 кДа Инактивируется нагреванием до 75оС в течение 10 минут Отсутствие эндодезоксирибонуклеаз 5Х реакционный буфер в комплекте — наличие ОКПД 24. 66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░	░░░░░░
Дитиол фосфорамидит Фасовка — не менее 0.065 г Количество — не менее 100 мкМоль Молекулярный вес — 654.81 Химическая формула — C34h53N2O5PS2 Температура хранения — от -10° до -30°C ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░░	░░░░░░░░
Носитель для синтеза олигонуклеотидов 3′-DTPA CPG Фасовка — не менее 100 мг Молекулярный вес — 214. 19 Назначение — научные исследования Температура хранения — от -10° до -30°C ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
5′-BHQ-2 фосфорамидит Фасовка — не менее 0.068 г Количество — не менее 100 мкМоль Молекулярный вес — 678.72 Молекулярная формула — C33h53N8O6P Соединение для разбавления — безводный ацетонитрил Температура хранения — от -10° до -30°C ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
Набор дезоксинуклеозид трифосфат Фасовка — не менее 4 d’NTPs Объем каждого дезоксинуклеозид- трифосфата — не менее 1 мл Концентрация — не менее 100 мМ Температура хранения -20°C ОКПД 24. 66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
Агароза Фасовка — не менее 100 г Высокая чистота — наличие Отсутствие нуклеаз и протеаз — наличие Электроэндоосмос — не более 0.13 Факторы, ингибирующие лигазу, эндонуклеазу — отсутствие Влажность — не более 10% Протеаза — отсутствие Рибонуклеаза — отсутствие Сульфаты — не более 0.15% ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
Агароза LE Фасовка — не менее 500 г Форма — порошок Температура плавления — не менее 90°C Диапазон длин разделяемых фрагментов ДНК или РНК — от 500 п. н. до 23 000 п.н. Назначение — гель-электрофорез Назначение — для молекулярных и биологических исследований Низкая электроэндоосмотичность — наличие ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░░	░░░░░░░░
DL-Дитиотреитол Фасовка — не менее 5 г Квалификация — Biotechnology Grade Чистота — не менее 99.5% Диапазон температуры плавления — от 39° до 43°C ДНКазы, РНКазы, протеиназы — отсутствие Температура хранения — от 0° до -20°C ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
Стрипы с нанесенными амфолитами ReadyStrip IPG Strips ph 3-10 Стрипы с иммобилизованным градиентом рН — наличие Фасовка — не менее 12 шт Длина — не менее 7 см рН 3-10 — наличие Температура хранения -20°C ОКПД 24. 66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░	░░░░░░░
N,N’ — Метилен — бис-акриламид Фасовка — не менее 50 г Молекулярный вес — 154.17 Химическая формула — C7h20O2N2 Хранение при комнатной температуре Чистота — не менее 99% Акриловая кислота — не более 0.001% Дезоксирибонуклеаза — отсутствие pH (1%, 0.1M NaCl) — 5.0 Протеаза Отсутствие Рибонуклеаза Отсутствие ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
D-(+)-Глюкоза, моногидрат Фасовка — не менее 500 г Качество — не менее USP Grade ОКПД 24. 66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░	░░░░░░
5′-Альдегид-модификатор С2 фосфорамидит Фасовка — не менее 0.048 г Количество — не менее 100 мкМоль Молекулярный вес — 480.58 Химическая формула — C25h51N2O5P Температура хранения — от -10° до -30°C Соединение для разбавления — безводный ацетонитрил ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	░ ░	░░░░░░░	░░░░░░░
Т4 ДНК лигаза, 1000 е. а. Рекомбинантная — соответствие Количество в упаковке — не менее 1 000 e.a. Концентрация — не менее 5 е.а./мкл Молекулярный вес — 55,3 кДа, соответствие Эндо- и экзодезоксирибонуклеазы, фосфатазы и рибонуклеазы — отсутствие Инактивация нагреванием до 70°С в течение 5 мин — соответствие 10Х реакционный буфер и 50% раствор полиэтиленгликоля — наличие Время лигирования при комнатной температуре — не более 10 мин ОКПД 24.66.42.323   Наборы химических реактивов специализированные прочие	1	3 348,05	3 348,05

1D PAGE Электрофорез

 

ПААГ готовят непосредственно перед проведением эксперимента. Из раствора(ов) акриламида и бисакриалмида. В качестве инициатора полимеризации используют персульфат аммония(ПСА), а катализатора тетраметилэтилендиамин (ТЕМЕД). Смесь для образования геля (состоящую из раствора акриламида, бисакриламида, буфера, SDS, инициатора и катализатора заливают в специально подготовленный блок (чаще всего это пластина). После изготовления (застывания, полимеризации, образования) блока геля его можно использовать для разделения в специально приспособленной для этого камере. Стандартно разделение происходит в вертикальном блоке.

Методики

Протокол SDS электрофореза по Лэмли.

Необходимые реактивы:

• 1. ТРИС (трис(гидроксиметил)аминометан, 2-амино-2-гидроксиметил-пропан-1,3-диол,CAS N 77-86-1) основание. Для электрофореза по Лэмли требования к Трис достаточно высоки. Использования реактива низких квалификаций типа Ч. или reagent, без дополнительной очистки недопустимо. ВНИМАНИЕ!!! Использовать солянокислую соль ТРИС – НЕЛЬЗЯ!!!
• 2. Акриламид. Идеальной является квалификация electrophoresis grade, но часто подходят и более дешевые марки акриламида, определить пригодность можно только экспериментальным путем. Не рекомендуется использование реактива квалификации reagent, for synthesis и т.п.
• 3. Бис акриламид, требования к реактиву аналогичны требованиям к акриламиду.
• 4. SDS , также весьма желательно использование реактива квалификации for molecularbiology и выше.
• 5. Глицин (аминоуксусная кислота), можно использовать реактив квалификации electrophoresis grade и выше, не рекомендуется использовать реактив квалификации ч. и reagent.
• 6. Соляная кислота квалификации ХЧ и выше (можно использовать разбавленный до 6 М реактив).
• 7. Персульфат аммония допустимо использование реактива ч и чда после тестирования. Так же необходимо тестировать реактив, если он хранился после даты выпуска более года.
• 8. Тетраметилэтилендиамин (TEMED) к нему не предъявляется очень высоких требований, но так как его расход очень небольшой, лучше использовать реактив высокого качества.
• 9. Глицерин можно использовать тоже без очень высоких требований – косметический , ч , чда, вполне подходят.
• 10. 2-Меркаптоэтанол (МЭ) или дитиотриэтол (ДТТ). К меркаптоэтанолу требования невысокие, но некоторые партии МЭ независимо от квалификации могут содержать примесь белков установить это можно только экспериментально. К ДТТ тоже требования невысокие.
• 11. Бромфеноловый синий – без высоких требований.
• 12. Дистиллированная вода – аналитической или фармацевтической чистоты.
• 13. Фильтровальная бумага.

Оборудование:

• 1. Камера для вертикального электрофореза с комплектом для заливки геля (стекла прокладки, устройство для заливки).
• 2. Блок питания постоянного напряжения с максимальным напряжением 300-400 V и мощностью от 50 W. Желательно, чтобы в блоке была стабилизация по току.
• 3. Автоматические пипетки со сменными наконечниками на варьируемые объемы: 1-10 мкл (2-20 мкл), 20-200 мкл, 100-1000 мкл. Наконечники к ним.
• 4. Полипропиленовые микропробирки – 1. 5 мл (типа eppendorf).
• 5. Цилиндры мерные на 10, 50, 100, 250, 1000 мл. Вместо 10 мл и 50 мл цилиндров можно использовать центрифужные полипропиленовые пробирки на 15 мл и 50 мл (типа falcon) с нанесенными делениями.
• 6. Весы лабораторные с минимальным пределом взвешивания 0.5 г и максимальным 500 г, с ценой деления 10 мг.
• 7. рН метр с ценой шкалы 0.01 рН.
• 8. Пипетки стеклянные, градуированные на слив – 5 и 10 мл.
• 9. Общелабораторная посуда: стаканы термостойкие, воронки, стеклянные палочки, банки для растворов с пробками и т.д.
• 10. Водяная баня со штативом под микропробирки 1.5 мл или твердотельный термостат с гнездами под те же пробирки.
• 11. Магнитная мешалка (можно самого начального уровня) с набором магнитных якорей в полипропиленовой или политетерафторэтиленовой оболочке.

Приготовление запасных растворов

1) 10% SDS, 200 мл

Взвесить 20 г SDS, перенести количественно (ополаскивая небольшим 5-10 мл количеством воды посуду для взвешивания и собирая промывки в посуде для приготовления. Посуда для приготовления должна содержать надежную метку, указывающую объем 200 мл. Поместить в посуду для приготовления чистый якорь для магнитной мешалки и при постоянном перемешивании добавить сначала примерно 100 мл воды, а потом при постоянном перемешивании постепенном растворении довести объем раствора водой до метки 200 мл и дождаться полного растворения. Извлечь якорь и довести объем до метки 200 мл, размешать раствор стеклянной палочкой. Перенести раствор в посуду для хранения с герметичной пробкой. Хранить при комнатной температуре, в холодильнике выпадает в осадок.

2) 30/1 акриламид (АА30/1), 100 мл

Взвесить 29 г акриламида, перенести количественно в посуду для растворения. Взвесить 1 г бисакриламида и перенести количественно в посуду для растворения. Посуда для растворения должна иметь надежную метку, соответствующую объему 100 мл.

Добавить 50 мл воды, нагретой до 50-600^оС погрузить чистый якорь магнитной мешалки медленно при постоянном перемешивании и растворении добавлять воду до метки 100 мл дождаться полного растворения. Извлечь якорь довести объем до метки 100 мл водой и размешать стеклянной палочкой до гомогенного состояния. Перелить раствор в посуду для хранения с герметичной пробкой хранить на температуре +8-100^оС (нежелательно хранить при более низкой температуре, может выпасть осадок).

3) 1.5 М Трис-HCl pH=8.8 (Трис-8.8), 100мл

Взвесить 18.2 г Трис-основания. Перенести количественно в посуду для приготовления, которая имеет надежную метку объема 100 мл. Добавить примерно 60 мл воды погрузить в раствор чистый якорь магнитной мешалки. Поставить посуду с раствором на магнитную мешалку и включить перемешивание добиться регулировкой оборотов небольшой скорости перемешивания от 40 до 90 об/мин. Осторожно (чтобы на повредить электроды якорем) погрузить в раствор электрод(ы) работающего рН-метра и приступить к подведению рН с помощью медленного, по каплям добавления концентрированной или 6 М соляной кислоты до значения 8.8. Трис относительно медленно реагирует с соляной кислотой, поэтому рекомендуется оставить раствор на ночь и проверить его рН на следующий день. При необходимости подвести рН раствора. После того как вы довели рН до величины 8.8, доведите водой объем раствора до отметки 100 мл при постоянном перемешивании извлеките якорь и снова добавьте воды до отметки, перемешивая раствор стеклянной палочкой. Перенесите раствор в посуду для хранения с герметичной пробкой. Раствор рекомендуется хранить в холодильнике при температуре 4-100^оС.

4) Раствор 0.625 М Трис-HCl рН-6.8 (Трис-6.8), 100 мл

Взвесить 7.57 г Трис-основания. Перенести количественно в посуду для приготовления, которая имеет надежную метку объема 100мл. Добавить примерно 45-50 мл воды погрузить в раствор чистый якорь магнитной мешалки. Поставить посуду с раствором на магнитную мешалку и включить перемешивание. Добиться регулировкой оборотов небольшой скорости перемешивания от 40 до 90 об/мин. Осторожно (что бы на повредить электроды якорем) погрузить в раствор электрод(ы) работающего рН-метра и приступить к подведению рН с помощью медленного, по каплям добавления концентрированной или 6 М соляной кислоты до значения 6. 8. Трис относительно медленно реагирует с соляной кислотой, поэтому рекомендуется оставить раствор на ночь и проверить его рН на следующий день. При необходимости подвести рН раствора. После того как вы довели рН до величины 6.8, доведите водой объем раствора до отметки 100 мл при постоянном перемешивании извлеките якорь и снова добавьте воды до отметки, перемешивая раствор стеклянной палочкой. Перенесите раствор в посуду для хранения с герметичной пробкой. Раствор рекомендуется хранить в холодильнике при температуре 4-100^оС.

5) 10% раствор персульфата аммония(ПСА), 10 мл

Взвесить 1 г персульфата аммония в новой или чистой и сухой пробирке из полипропилена типа falcon. Добавить в пробирку воды до отметки 7мл, закрыть герметичной пробкой и интенсивно встряхивая, перемешать. Поставить пробирку вертикально и дать стечь раствору вниз 10 мин. Довести объем раствора водой до отметки 10 мл и снова перемешать. Перенести раствор в посуду для хранения с герметичной пробкой. Раствор хранить в холодильнике при температуре 4-100^оС.

6) 10х Электродный буфер, 1л

Взвесить 144 г глицина и 30 г Триса-основания. Перенести количественно в посуду для приготовления, имеющую надежную метку объема 1 л. Добавить 0.7 л дистиллированной воды, погрузить в раствор чистый якорь магнитной мешалки поставить раствор в посуде на мешалку и перемешивать до растворения, затем при перемешивании довести объем раствора до 1 л водой. Извлечь якорь, проверить объем, при необходимости довести до 1 л и перемешать стеклянной палочкой. Перенести раствор в посуду для хранения с герметичной пробкой. Раствор рекомендуется хранить в холодильнике при температуре 4-100^оС.

Буфер для проб

Однократный буфер 20 мл

• Возьмите мерный цилиндр на 25 мл или полипропиленовую пробирку на 50 мл с делениями (типа falcon).
• Добавьте:
• 2 мл Трис-6.8,
• 5 мл 10%SDS,
• 2 мл глицерина,
• 10 мг БФС (бром феноловый синий) можно примерно на глаз.
• Доведите объем раствора до 20 мл, перемешайте встряхиванием. Хранить при комнатной температуре.

3х Буфер для проб 10 мл

• Возьмите полипропиленовую пробирку на 15 мл с градуировкой, типа falcon
• Добавьте:
• 3 мл Трис-6.8.
• Взвесьте и перенесите количественно 750 мг SDS в пробирку.
• Добавьте 3 мл глицерина.
• Добавьте 15 мг БФС (можно приблизительно не глаз).
• Доведите раствор горячей водой (50-800^оС) до объема 10 мл и перемешайте встряхиванием.

Проведение электрофореза по Лэмли

Приготовление разделяющего геля.

Внимание!!! Все растворы для приготовления перед смешением должны иметь комнатную температуру

Раствор для геля 10 мл: возьмите любой сосуд, вмещающий в себя 10-15 мл раствора.

Добавьте 2.5 мл Трис рН-8.8 и необходимое для нужной концентрации акриламида (см. Таблица) количество раствора акриламида АА30/1 и воды.

Таблица

Концентрация геля, %	6	7	8	10	12	15	20
Объем АА30/1, мл	2	2.33	2.67	3	4	5	6.67
Объем воды, мл	5.29	4.96	4.62	4.29	3.29	2.29	0.62

 

Перемешать (без пузырей) раствор.

Добавить 100 мкл 10% SDS, перемешать без пузырей.

Собрать блок для заливки геля.

Добавить в раствор для геля сначала 100 мкл 10% ПСА и затем 10 мкл ТЕМЕД аккуратно размешать без пузырей и залить в блок для геля (в зависимости от конструкции наслоить на поверхность раствора в блоке небольшое количество воды). Дождитесь полимеризации геля.

Приготовление концентрирующего геля 5 мл

В посуду 10-15 мл добавьте:

1 мл Трис рН-6.8

0.75 мл АА30/1 и 3.145 мл воды.

Аккуратно перемешайте раствор без пузырей.

Добавьте 50 мкл SDS, перемешайте без пузырей.

Возьмите блок с заполимеризовавшимся разделяющим гелем, удалите из него лишнюю воду путем стекания на фильтровальную бумагу. Подготовьте гребенку. Подготовьте блок к заливке концентрирующего геля. Добавьте к раствору для концентрирующего геля 50 мкл 10% ПСА и 5 мкл ТЕМЕД аккуратно (без пузырей) перемешайте и залейте в блок вставьте гребенку для образования карманов в геле в блок. Дождитесь полимеризации концентрирующего геля.

Подготовка проб.

В «сухую» безводную пробу или в осадок белков в микропробирке 1.5 мл добавляют однократный буфер для проб. Затем в вытяжном шкафу добавляют 2-10%об меркаптоэтанола. Пробу интенсивно встряхивают (или пипетируют автоматической пипеткой) и помещают в кипящую водяную баню или термостат на 100^оС, время инкубации от 5 до 30 мин. После инкубации пробы центрифугируют при 10 000-12 000g от 30 с. до 15 мин. в зависимости от того, как они растворились. Вместо МЭ можно использовать 100-200 мМ конечную концентрацию DTT из стокового 1М раствора (хранить на -20 в герметичной таре залитой под пробку). Перед употреблением разморозить и взболтать, затем отобрать небольшой объем и нагреть до 50-60^оС и внести в пробу необходимый объем.

Жидкая проба

В жидкую пробу (раствор белка) добавляют половину объема пробы трехкратного буфера для проб, далее добавляют 2-10%об от общего объема меркаптоэтанола. Далее поступают аналогично «сухой» пробе.

Проведение электрофореза

Поместите залитый блок в камеру приготовьте электродный буфер в объеме необходимом для камеры. Для этого 10х электродный буфер надо развести в отношении 1:9. Залейте электродный буфер в камеру. В верхнюю камеру (католит) ОБЯЗАТЕЛЬНО!!!! нужно добавить 10%SDS в объеме 0.01 объема буфера в верхней камере.

Нанесите пробы в карманы геля. Для нанесения используют микрошприц типа Hamilton на 10, 25, 50,100 мкл (в зависимости от загрузок) или автоматическую пипетку со специальным оттянутым наконечником для нанесения проб в гель. Подключите камеру к блоку питания. Обычно используется три режима в течение хода электрофореза:

• 1) вхождение проб в концентрирующий гель. Напряжение примерно 5 В/см;
• 2) пробы в концентрирующем геле. Напряжение примерно 7-10 В/см;
• 3) пробы вошли в разделяющий гель. Напряжение примерно 20-35 В/см.

В см. выражена длина геля.

Окончание электрофореза контролируют при подходе фронта красителя БФС к нижней границе геля.

Окраска и дальнейшие манипуляции с гелем зависят от целей эксперимента.

Требования к образцам.

• 1) Для успешного проведения эксперимента. Необходимо знать количественное содержание общего белка и белка интереса в образцах.
• 2) В образцах не должно содержаться большое количество сильной кислоты и щелочи, более 50 мМ концентрации.
• 3) В образцах должна отсутствовать соль в высокой концентрации, более 250 мМ в пересчете на ионную силу NaCl.
• 4) Плохо растворимые и мембранные белки требуют модифицированных, отличных от стандартной процедуры, методик.

 

Акриламид/бис-акриламид, 29:1, 30% раствор (CAS-)

CAS: —

MF: —

MW: —

: 

Наличие:  В наличии

ГЭ4227-100МЛ

стеклянная бутылкаинформация

24 февраля 2023 г.

100 мл

26,90 $

ГЭ4227-500МЛ

информация о бутылке HDPE

24 февраля 2023 г.

500 мл

50,40 $

ГЭ4227-1Л

информация о бутылке HDPE

24 февраля 2023 г.

1 л

92,40 $

GE4227

НАГРУЗКА

Единицы мгггкгмллиМЕ

Корзина отзывов (0) и оплата

• Описание продукта
• Спецификация продукта
• Информация о безопасности
• Цитаты (0)

Код Glentham

GE4227

Категории продуктов

Биохимикаты Реагенты для гель-электрофореза ДНК/РНК Реагенты для гель-электрофореза белков

CAS RN

—

Температура хранения

+4 ° C

Температура доставки

Ambient

Гармонизированный тарифный код

382000000

Физическое описание

, ясная, без цветов

ACRYLILMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILEMILE —

28–30

Фильтрация

0,2 ​​мкм

Концентрация

30 %

Версия спецификации

1,0

Пиктограммы0003

Сигнальное слово

Предупреждение

Краткая характеристика опасности

h402:  Вреден при проглатывании.
h415: Вызывает раздражение кожи.
h417:  Может вызвать кожную аллергическую реакцию.
h419: Вызывает серьезное раздражение глаз.
h432:  Вредно при вдыхании.
h440:  Может вызывать генетические дефекты.
h450:  Может вызывать рак.
h472:  Вызывает повреждение органов.

Меры предосторожности

P201:  Перед использованием получить специальные инструкции.
P260:  Не вдыхать пыль/дым/газ/туман/пары/аэрозоль.
P271:  Использовать только на открытом воздухе или в хорошо проветриваемом помещении.
P280:  Надевайте защитные перчатки/защитную одежду/средства защиты глаз/лица.
P301 + P312: ПРИ ПРОГЛАТЫВАНИИ: При плохом самочувствии позвоните в ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ ЦЕНТР или к врачу.
P330: Прополоскать рот.
P302 + P352: ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ: Промыть большим количеством воды с мылом.
P304 + P341: ПРИ ВДЫХАНИИ: Если дыхание затруднено, вынесите пострадавшего на свежий воздух и дайте ему отдохнуть в удобном для дыхания положении.
P312:  Если вы плохо себя чувствуете, позвоните в ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ ЦЕНТР или к врачу.

Номер ООН

UN3426 — 6.1 — PG III

Если вы публикуете исследование с использованием GE4227, пожалуйста, свяжитесь с нами, чтобы внести свой вклад в наш список ссылок.

паспорт безопасности

АнглийскийФранцузскийНемецкийИтальянскийИспанскийГолландский

Спецификация Посмотреть Технический паспорт

Посмотреть

Сертификат анализа

Свяжитесь с нами О GE4227

Альтернативные продукты Искать все альтернативные продукты

GX0184
Провод термопары типа B Pt/Rh 94/…

GE5358
7-гидрокси-4-аминометилкумарин

GT1202
Реагент Брэдфорда
КАС-

GX3264
4-(8-хлор-6,11-дигидро-5H-бензо-…
≥ 98,0%

Недавно просмотренные товары

ГЭ4227
—

Акриламид/бис-ак…

Описание упаковки Для GE4227-100ML

Описание: 100 мл стеклянный винчестер с синей пластиковой крышкой

Материал: янтарное стекло

Размеры: 0 x 0 x 0 (мм)

Номинальный объем: 100 (2 мл) 900 UN 900 сертифицирован: №

Вес: 231,865 г

Если вам нужна дополнительная информация, позвоните нам по телефону +44 (0) 1225 667798 или отправьте нам электронное письмо.

Описание упаковки Для GE4227-500ML

Описание: 500 мл с завинчивающейся крышкой, горлышко 28 мм, черная пластиковая бутылка для жидкости

Материал: Флакон черного цвета из полиэтилена высокой плотности с черной ватной крышкой

Размеры: 0 x 0 x 0 (мм)

3 Номинальный объем: 500 (мл)

Сертификат ООН: №

Вес: 33,68 г

Если вам нужна дополнительная информация, позвоните нам по телефону +44 (0) 1225 667798 или отправьте нам электронное письмо.

Описание упаковки Для GE4227-1L

Описание: 1000 мл с завинчивающейся крышкой, горлышко 28 мм, черная пластиковая бутылка для жидкости

Материал: Флакон черного цвета из полиэтилена высокой плотности с черной ватной крышкой

Размеры: 0 x 0 x 0 (мм)

3

3 Номинальный объем: 1000 (мл)

Сертификат ООН: №

Вес: 49,79 г

Если вам нужна дополнительная информация, позвоните нам по телефону +44 (0) 1225 667798 или отправьте нам электронное письмо.

ROTIPHORESE®NF-акриламид/бис-раствор 30 (29:1), 250 мл | СТРАНИЦА готовых решений | PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле) | Электрофорез | Науки о жизни | Carl Roth

ROTIPHORESE ^® 30 %, готовый к использованию, газостабилизированный, без флуоресценции

Готовые к использованию продукты и реагенты

Учтите, что этот продукт может подлежать некоторым юридическим санкциям, например, для получения декларации конечного пользователя или запрета некоторых приложений. Для получения подробной информации, пожалуйста, свяжитесь с вашим коллегой в нашем отделе продаж!

Примеры воздействия: Наносит вред здоровью, вызывает раздражение глаз, кожи или органов дыхания. Смертельны в больших количествах. Безопасность: Как было сказано ранее, в случае раздражения кожи или попадания в глаза промыть водой или подходящим средством.

Примеры воздействия: Обладают аллергенным действием, канцерогенными, мутагенными, токсичными для репродуктивной функции и вызывают токсичность для развития (репротоксичность) или повреждение органов. Безопасность: Вы должны быть хорошо информированы перед началом работы с этими веществами; надевайте защитную одежду и перчатки, защитные очки и маску или средства защиты органов дыхания.

Опасность

h402-h415-h417-h419-h440-h450-h461f-h472

я вредно при проглатывании, вызывает раздражение кожи, может вызывать аллергическую кожную реакцию, вызывает серьезное раздражение глаз, может вызывать генетические дефекты, может вызывать рак, подозрение на нарушение фертильности (при проглатывании), вызывает повреждение органов при длительном или многократном воздействии

P201 P280 P301+P312 P302+P352 P305+P351+P338 P308+P313

я получить специальные инструкции перед использованием, носить защитные перчатки/защитную одежду/защиту глаз/защиту лица, ПРИ ПРОГЛАТЫВАНИИ: обратиться в ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЙ ЦЕНТР/к врачу, если вы плохо себя чувствуете, ПРИ ПОПАДАНИИ НА КОЖУ: промыть большим количеством воды с мылом, ПРИ ПОПАДАНИИ В ГЛАЗА: промыть осторожно водой в течение нескольких минут. Снимите контактные линзы, если они есть и это легко сделать. Продолжайте полоскание, ЕСЛИ подверглись воздействию или обеспокоены: Обратитесь за медицинской консультацией/помощью

Сопутствующие товары

• ROTIPHORESE ^® Гель 30 (37,5:1) ROTIPHORESE ^® 30 %, готовый к использованию, газостабилизированный
• ROTIPHORESE ^® NF-акриламид/бис-раствор 30 (29:1) ROTIPHORESE ^® 30 %, готовый к использованию, газостабилизированный, без флуоресценции

Кол-во в упаковке.

250 мл 1 л

Гелевый раствор, гель-растворы PAGE

Плотность (D) 1,024 г/см³
Температура кипения (т.кип.) ~100 °C
Темп. +4 °C
WGK 3

Водный исходный раствор акриламида и бисакриламида в соотношении 29:1 для секвенаторов PAGE и ДНК.
Анализ белков/пептидов <30 кДа, олигонуклеотидов ДНК и долгосрочное секвенирование ДНК.